粗脂肪的提取和定量測定

更新時間：2018-09-26

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喆圖小編就來說說用索氏提取法測定粗脂肪含量的原理及操作，熟悉重量分析的基本步驟。

實驗原理：脂肪是丙三醇（甘油）和脂肪酸結合成的脂類化合物，能溶于脂溶性有機溶劑。

本實驗利用脂肪能溶于脂溶性溶劑這一特性，用脂溶性溶劑將脂肪提取出來，借蒸發(fā)除去溶劑后稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進行，通常使用的脂溶性溶劑為億醚，或沸點為30℃～60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物質除脂肪外，還有游離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故稱為“粗脂肪”。同時，樣品中結合狀態(tài)的脂類（主要是脂蛋白）不能直接提取出來，所以該法又稱為游離脂類定量測定法。索氏抽提法測定脂肪大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1～2次，然后浸泡在溶劑中過夜；次日再繼續(xù)抽提，則可明顯提高提取率。

接下來喆圖小編就來說說實驗操作前的一些準備工作及步驟：

將電熱恒溫水浴鍋的水溫事先加熱（80℃）。務必保證提取管和燒瓶內干燥、潔凈；若否，將其洗凈并置于鼓風干燥箱內120℃烘干。

1.折濾紙斗，取一張?11cm的濾紙，折成筒狀，再將其一端折起來封死，便做成了濾紙斗。

2.稱樣：先將數粒花生仁去皮，在碾缽中用碾錘*搗碎作為實驗樣品。將濾紙斗在電子天平上稱重，然后用藥勺取２勺（約2g）樣品裝入濾紙斗中，把濾紙斗的開口處折起來封死；防止樣品泄出濾紙斗。調整濾紙斗的高度，使其放在抽提管中時略低于虹吸管的上彎頭處。將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱重，兩質量之差即為樣品的質量。

3.提取：將索氏提取儀，從下至上安裝。首先安裝好燒瓶，并調整其高度，使其剛好能浸入電熱恒溫水浴鍋中的水中。將裝置從水浴鍋的水中取出，繼續(xù)安裝提取管，把裝有樣品的濾紙斗放入提取管內，向提取管中緩緩倒入石油醚直至液面達到虹吸管上彎頭部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入石油醚，使其液面達到次液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來水管相連，將冷凝管安裝到提取管上，檢查一下，確保所有接口均對接完好（不漏氣，不打滑）。輕輕打開自來水（冷凝用），將索氏提取儀整個裝置放入電熱恒溫水浴鍋中加熱提取（水溫80℃左右）。提取時間2～4h，約虹吸20次以上，記錄每次虹吸所需的時間和虹吸次數。附注：若要將樣品的粗脂提取*，提取時間至少為12h以上。由于實驗時間的限制，我們的提取率只能達到80％左右。

4.回收石油醚：提取2h后，當石油醚在提取管中的液面即將達到虹吸管的上彎頭處時，從電熱恒溫水浴鍋中取出索氏提取儀裝置，室溫冷卻5～10min；取下平底燒瓶，將提取管的下端口插入回收瓶中，傾斜裝置，提取管中的石油醚會虹吸而流入回收瓶中，達到回收的目的。再裝上平底燒瓶，繼續(xù)放入電熱恒溫水浴鍋中加熱直至冷凝管下端無石油醚滴下，表明平底燒瓶中的石油醚已經蒸干。注意：必須蒸干后才能放入鼓風干燥箱烘干，否則會引起火災。取下平底燒瓶，回收提取管中的石油醚。

5.稱量粗脂質量：將平底燒瓶放入120℃的鼓風干燥箱中烘15min，取出冷卻后稱重（須戴手套，以免燙傷）。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈，于120℃的鼓風干燥箱中烘干（約15min），取出冷卻后稱重，兩者的質量之差就是粗脂的質量。

清潔

從提取管中取出濾紙斗，清洗提取管，整理好桌面上的儀器和試劑，并注意清潔自己的操作臺。

計算

樣品粗脂的含量（%）=（粗脂的質量/樣品的質量）*100%

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