用人工氣候箱做植物的組織培養

更新時間：2019-08-08

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今天小編帶大家了解一下植物組織培養的過程：

首先根據所配培養基的要求，從各母液只能感取出大量元素、微量元素、鐵液、維生素、激素、蔗糖等，置于容量瓶中定容至100ml，稱取瓊脂加入400ml置于大燒杯中加熱時不斷攪拌，十分鐘后瓊脂溶解，呈透明狀即可，放置稍涼。
然后溶解好的瓊脂溶液中加入前面所取出的各物質及糧溶液100ml，不斷攪拌使培養基混合均勻。
用PH計或試紙測PH值，用INNaOH或INNCL調至5.8。

將配制好的培養基分裝于清洗干凈，烘干后的三角瓶中，培養基高度約1cm左右，瓊脂約在40度時才凝固，所以有充足的時間業分裝。

將分裝好的培養基的三角瓶中塞上棉塞，大小要合適，然后包上牛皮紙，用橡皮盤扎緊。牛皮紙上標以記號準備滅菌。
培養基的滅菌與保存。
培養基內含有豐富的營養物質，有利于細菌和真菌繁殖，所以培養基配好后要及時滅菌，用高壓鍋滅菌注意以下幾點：
（1）檢查鍋內的水量，一般高度到支持鍋座水平即可。
（2）蓋好鍋蓋，擰緊螺旋，然后檢查排氣閥是事通暢。
（3）用煤氣灶或電爐加熱，當氣壓指針上升至6時，放一次氣或打開放氣閥，加熱至鍋內冒出大量熱氣，以排盡鍋內空氣。
（4）高壓鍋內溫度達1200C，0，1Mpa壓力時，這時保持高壓來菌20分鐘，以后切斷電源，是鍋內壓力自然慢慢下降，也可緩緩打開放氣閥放氣，使鍋內壓力接近于0（氣壓表指針下降至0），這時*打開放氣閥。
（5）打開鍋蓋，取出培養基、滅菌水、培養皿、濾紙等。滅過菌的培養基通常置于100C下保存，待培養基放置2—3天后，瓶內水吸收干后即可使用。培養基滅菌后不宜久放，一般不超過一個月，多數情況滅菌后兩周內使用完。
接種——胡蘿卜愈傷組織的培養。
接種，是指經過消素好的材料在無菌的情況下切成小塊（外植體）并放入培養基的過程，要在無菌的環境中進行。接種進要求無菌操作，所有接種材料要預選消毒。
提前15分鐘將超凈工作臺打開過濾空氣。
雙手用肥皂洗凈，以70%乙醇棉擦試一遍。
取已洗凈的胡蘿卜5cm切段，用70%乙醇浸炮30秒。然后無菌水沖凈，再2%安替福氏浸炮15秒，無菌水沖洗3——4遍置培養皿中。
在培養皿中用打孔器取下胡蘿卜的韌皮部切段，切去兩端，將材料切成厚3mm的薄片。
接種，用鑷子將材料薄片迅速接入培養基中，在酒精燈上移動著燒一下瓶口，塞上棉花塞。

培養，接好種的培養基，放置溫度23——28℃光照1000——5000ＬuX，光照時間每天約16——18小時的人工氣候箱中進行培養。隨著培養組織的不斷生長和細胞分裂，不久即形成愈傷組織并開始
植株誘導和轉載
除一些基尖，側牙球莖之類的材料能直接培養長大志植物外，葉，莖段，花瓣等要經過一個脫分化和再分化的過程，才能長成植株。
由于加入培養基中各種激素的比例不同，外植本可以沿著不同方向分化；一種是先由外植本產生愈傷組織，有愈傷組織再分化出不字根或不定芽，也可以由愈傷組織產生胚狀體，再發育成小植株：另一種是不經愈傷組織，可直接誘導出胚狀全而發育成植物。
不同來源的外植體再生植株的途徑
胡蘿卜肉質根誘導產生了愈傷組織之后，需進一步轉移至分化培養基誘導產生根和芽，以獲得再生植株。
生長點、側芽、原球莖、胚狀體根、莖段、葉、花芽、花瓣、胚狀體愈傷組織；再分化的芽和根；試管苗。

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