上海喆圖科學(xué)儀器
Zhetu Scientific Instrument
服務(wù)熱線：17321051213
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更新時(shí)間：2019-04-25
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喆圖小編來給大家講講實(shí)驗(yàn)?zāi)康娜缑割惖纳a(chǎn)，建立合適、的篩選模型，并從特定的樣品如海泥中篩選出高產(chǎn)菌株。
實(shí)驗(yàn)所需儀器設(shè)備：滅菌鍋，液晶顯示生化培養(yǎng)箱，恒溫?fù)u床，玻璃儀器
需準(zhǔn)備的培養(yǎng)基 A.富集培養(yǎng)基（液體）：海水2216E 液體培養(yǎng)基、蛋白胨5.0，酵母粉1.0，陳海水1L，pH7.6。取50mL 分裝250mL 三角瓶后，8層紗布封口，外包1層牛皮紙， 115℃高溫滅菌30min。 B. 2216E 斜面（固體）：
海水2216E 液體培養(yǎng)基中加入2%的瓊脂粉，加熱溶化瓊脂，每支試管內(nèi)加入5mL，115℃高溫滅菌30min，滅菌后擺斜面。
無菌生理鹽水：NaCl 0.85% 去離子水配制。每支試管加入4.5mL，蓋上試管帽、包扎、115℃高溫滅菌30min。
堿性蛋白酶篩選培養(yǎng)基：海水2216E-脫脂奶粉平板：
A：4%脫脂奶粉，蒸餾水；
B：海水2216E 液體培養(yǎng)基中加4%瓊脂粉，pH10.0。A 和B 115℃高溫滅菌30min 后稍冷卻，將A在無菌超凈臺中倒入B中，搖勻后倒入無菌平板。
取少量海泥樣品加入富集培養(yǎng)基中，28℃，150rpm 于恒溫振蕩培養(yǎng)24個(gè)小時(shí)。
搖勻富集后的富集培養(yǎng)液，用無菌生理鹽水作梯度稀釋至10-5、10-6后各涂1個(gè)篩選平板， 在28℃液晶顯示生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 小時(shí)。
產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選
觀察篩選平板上所產(chǎn)生的水解圈，拍照。每組選取1株水解圈大而明顯的菌株，接在斜面上培養(yǎng)。
以上內(nèi)容僅供參考，如需了解詳情請聯(lián)系喆圖客服！
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